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点击次数：2315 更新时间：2017-08-18

如何选择液相色谱柱

      来自于色谱系统的污染主要指，HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒，以及流动相系统过滤不*残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指未*溶解的样品或者已*溶解的样品进入色谱系统中，由于样品溶剂和流动相溶剂对样品溶解存在的溶解度差异，导致沉淀析出污染系统。

       特别是对于中药 、天然产物、合成中间体及生物药品的检测，因基质的复杂性，色谱柱受污染的情况会加严重。污染会导致色谱系统压力升高、色谱柱塌陷、填料变色等，从而带来检测成本高，测试结果不准确等各种影响。

以下几种情况见意使用保护柱：

1、中药、天然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析--因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重，梯度洗脱时影响大。

2、生物样品分析--因样品的不可逆吸附导致的污染，保护柱可先于分析柱承受这种污染，从而延长分析柱寿命。

?；ぶ苤匾?，但选择合适的?；ぶ匾?，选择或使用不当也可能带来截然相反的效果。

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从材质上分：不锈钢材质和PEEK(聚醚醚酮)材质,PEEK材质优缺点--样品对金属离子比较敏感时，选择PEEK材质比较合适，比如某些蛋白分板会用到PEEK材质的分析柱，主要就是考虑到这方面的因素；不锈钢材质优缺点--大部分小分子化合物的分析，选择不锈钢材质?；ぶ佣啵乇鹗堑绷鞫嗵逑凳褂玫剿那膺秽═HF）或DMSO等一些溶解性较强的溶剂时，必须选择不锈钢材质，甚至对于HPLC系统的管路也需要替换成不锈钢材质，因THF对于PEEK管路有相当强的腐蚀作用。

从结构上分：卡套式（柱芯+柱套）和直接填装短柱

直接填装短柱公优缺点--这种结构的?；ぶ抵示褪嵌讨湃钡?-这种的?；ぶ抵示褪嵌痰纳字?，一般填装的填料跟分析柱填料*一样，生物样品分析中，用这种类型?；ぶ佣?，除可过滤一些不溶颗粒外，还可除去一些在分析柱上易吸附的杂质。缺点是，一次性使用，污染严重时，只能报废。

卡套式?；ぶ湃钡?-卡套式保护柱的柱套可反复使用，柱芯污染后可替换，厂家会提倡配套瓣?；ぶ荆郝蚴毙枰⒁?，柱芯中有与分析柱匹配的填料，需要确认柱芯中的填料类型再购买。同时，柱芯与柱套需是来源一同一厂家的同一规格否则，会存在匹配上的差异，导致峰型异?；蛘呗┮骸?/p>

从连接方式上分：独立式和直连式

独立式保护柱优缺点

?；ぶ头治鲋饧溆靡欢喂苈妨樱挥玫Ｐ挠敕治鲋诹由系钠ヅ湮侍?。但使用管路连接时，连接不当容易产生死体积。

直连式保护柱优缺点--?；ぶ涌诖菸?，可直接与分析柱连接，死体积小，UPLC分析时建议选择直连式?；ぶ尤钡悖汗郝蚴毙璞Ｖそ涌谟敕治鲋ヅ?。

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1：除非特殊情况，一般选择填料基质与分析柱基质*相同的?；ぶ?。

2、选择?；ぶ叽缈砂粗寤扑悖；ぶ寤捶治鲋寤?%-10%即可；如4.6*250mm的分析柱体积约为4ml，?；ぶ寤裳≡裨?.2-0.4ml之间为宜。同时，保护柱内径应与分析柱内径相同或相当。

保护住使用注意事项：

1、独立式?；ぶ敕治鲋邮?，连接管路尽可能短，且接口切面平常，尽量减少死体积以降低柱外展宽效应。

2、卡套式?；ぶ话阄幢曜⒁毫鞣较颍褂檬弊孕斜曜?，并按照标注方向来使用，以免正反向使用后，截留的杂质污染分析柱。

3、直接填装的短柱型保护柱，出现柱压升高或峰型变差时，可不接分析柱进行反向清洗，清洗溶剂可参考分析柱清洗溶剂。

4、卡套式保护柱，柱芯替换时，注意柱芯与柱套是否存在方向上的匹配，同时不易旋拧过紧，以防滑丝。

5、?；ぶ蛑疽话悴唤ㄒ槌逑?，因可能对填料表面修饰有影响。

6、如同一保护柱配不同的分析柱使用，每次使用前，?；ぶ柘惹逑床⒂昧鞫嗥胶獗；ぶ欢问奔浜?，再接分析柱使用。

保护柱与柱前过滤器的区别和使用：

使用?；ぶ哪康脑谟谘映し治鲋氖褂檬倜狈治鲋旒郯汗笫?，保护柱的价值尤其能体现，某些情况下，当使用的分析柱本身价格便宜，?；ぶ⒎潜匮?，推荐使用柱前过滤器合适。

柱前过滤器与?；ぶ秸咄庑蜗嗨?，差异主要在于：?；ぶ谛咀坝刑盍希肮似髂谛臼强苫坏穆似ㄒ话阄驳牟恍飧稚战岚澹?/p>

因此，从结构可以推测使用上的差异：柱前过滤器--通用性强，任何分析柱前都有可使用，因其滤芯只起到过滤和截留杂质的作用。滤片污染后可超声清洗，反复使用。

?；ぶ?-柱中填料除了截留杂质的作用外，也可除去样品中易吸附的杂质，这一点对生物样品分析尤其重要。

 

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